分光光度法是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。它具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn),是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的實(shí)驗(yàn)方法。
麥克林提供各類分光光度實(shí)驗(yàn)試劑及其衍生產(chǎn)品,具有純度等級(jí)高、生產(chǎn)工藝先進(jìn)、支持研發(fā)定制等特點(diǎn),能被廣泛適用于各類科研項(xiàng)目、研究實(shí)驗(yàn)中,歡迎選購(gòu)。
本文通過以下幾點(diǎn)介紹麥克林分光光度實(shí)驗(yàn)試劑的產(chǎn)品特性及相關(guān)應(yīng)用:
1. 實(shí)驗(yàn)原理及儀器
2. 分光光度法的優(yōu)勢(shì)
3. 分光光度法中的添加劑
4. 分光光度法的應(yīng)用
5. 麥克林分光光度法相關(guān)試劑及衍生產(chǎn)品介紹
實(shí)驗(yàn)原理及儀器
分光光度法的核心在于光的吸收,光源發(fā)出的光經(jīng)過單色器分解成單色光,通過待測(cè)樣品后,部分光被吸收,剩余的光被檢測(cè)器接收,轉(zhuǎn)化為電信號(hào),進(jìn)而得出吸光度[1]。參照?qǐng)D1所示,由以下儀器部件實(shí)現(xiàn)檢測(cè)過程:
光源:提供連續(xù)光譜的光源,如低壓鎢絲燈泡,用于產(chǎn)生波長(zhǎng)約為320~2500nm的連續(xù)光譜;
單色器:如棱鏡或光柵,用于將復(fù)合光分解成特定波長(zhǎng)的單色光。
吸收池:容納待測(cè)樣品,光通過此處時(shí)被樣品吸收。
檢測(cè)器:將透過樣品的光轉(zhuǎn)化為電信號(hào),常見的檢測(cè)器有光電池和光電管。
數(shù)據(jù)系統(tǒng):顯示并記錄檢測(cè)器輸出的電信號(hào),轉(zhuǎn)換為吸光度或透光率。
圖1分光光度計(jì)示意圖
分光光度法的優(yōu)勢(shì)
靈敏度高:分光光度法可以檢測(cè)非常低的濃度,一般可測(cè)定濃度為10-6 mol/L~10-5 mol/L,適用于微量組分的測(cè)定;
操作簡(jiǎn)便:樣品處理成溶液后,可以不經(jīng)分離干擾物質(zhì),一般只經(jīng)歷顯色和比色兩個(gè)步驟就可得出結(jié)果,從而縮短分析時(shí)間,加快測(cè)定速度;
測(cè)定快速:由于操作簡(jiǎn)便,分光光度法可以快速得到結(jié)果,適合于需要快速分析的場(chǎng)合;
準(zhǔn)確度適當(dāng):分光光度法的相對(duì)誤差一般為2%~5%,對(duì)于微量組分的測(cè)定,已能滿足要求。
分光光度法中的添加劑
樣品溶液中的添加劑可以分為多種類型,它們?cè)诜止夤舛确ㄖ邪缪葜煌慕巧?,以增?qiáng)分離效果或改善測(cè)定條件,以下是一些常見的添加劑分類:
1. pH調(diào)節(jié)劑:用于調(diào)節(jié)樣品溶液的酸堿度,以優(yōu)化特定物質(zhì)的穩(wěn)定性和吸收特性;
2. 穩(wěn)定劑:用于防止樣品在存儲(chǔ)或分析過程中降解;
3. 絡(luò)合劑:用于與樣品中的金屬離子形成絡(luò)合物,以改善其分析性能;
4. 顯色劑:在某些分光光度法分析中,需要添加顯色劑與樣品反應(yīng)生成有色化合物,從而進(jìn)行光吸收測(cè)量;
5. 熒光抑制劑:在熒光分光光度法中,用于抑制非特異性熒光,提高分析的特異性。
這些添加劑的選擇和使用取決于待測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)、分析目的以及所需的分離效果。在實(shí)際應(yīng)用中,可能需要根據(jù)具體情況選擇合適的添加劑和濃度,以確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。
分光光度法的應(yīng)用
分光光度法能夠應(yīng)用在多領(lǐng)域之下,以達(dá)到科研人員想要的目標(biāo),例如:
環(huán)境監(jiān)測(cè):測(cè)定水體中的化學(xué)需氧量[2]、重金屬離子[3]、有機(jī)污染物[4]等;
材料科學(xué):分析材料的吸光、透光等光學(xué)性質(zhì),用于新材料研發(fā)[5-6];
生物化學(xué):用于測(cè)定蛋白質(zhì)[7]、酶[8]、激素[9]等生物分子的濃度和活性。
麥克林分光光度法實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑介紹
麥克林分光光度法試劑產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
1. 結(jié)構(gòu)新穎、品種繁多
2. 純度等級(jí)高
3. 生產(chǎn)工藝先進(jìn)
4. 接受研發(fā)定制
項(xiàng)目號(hào)
CAS號(hào)
中文名
規(guī)格型號(hào)
水楊酸鈉溶液
適用于HJ536 水質(zhì)氨氮測(cè)定 水楊酸分光光度法
聯(lián)大茴香胺鹽酸鹽
for enzymic, spectrophotometric determination
紅菲繞啉二磺酸 二鈉鹽 三水合物
for the spectrophotometric det. of Fe, ≥98%(HPLC)
新亞銅試劑鹽酸鹽,一水合物
for spectrophotometric det. of Cu, ≥99%
N-(1-萘基)乙二胺 二鹽酸鹽 單甲醇鹽
for spectrophotometric det. of nitrate and nitrite, ≥99%
N,N-二甲基酪蛋白
for spectrophotometric det. of enzyme activity
N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽(TOOS)
for enzymic, spectrophotometric determination of H2O2, ≥98%
1,10-菲羅啉,一水合物
for the spectrophotometric determination of Fe, Pd, V, ≥99%
鋅試劑
for spectrophotometric det. of Cu, Zn
3,3'-二甲氧基聯(lián)苯胺
for spectrophotometric det. of Au, NO2-, Ce(IV), for the detection of Au, Co, Cu, SCN-, V, ≥97%
4,7-二苯基-1,10-菲啰啉
for spectrophotometric det. of Fe in serum, ≥99%
硝酸靈
for spectrophotometric det. of nitrate and perchlorate, ≥97%
3,4-甲苯二硫酚
for spectrophotometric det. of Mo, Sn, W, and also Ag and Re, ≥97%
巰基乙酸 溶液
~80% in H2O, for spectrophotometric det. of palladium, iron, uranium(VI), molybdates and nitrites
對(duì)甲苯胺
for spectrophotometric det. of Au,Tl(III),W, ≥99%
鉛試劑
ACS reagent, for spectrophotometric det. of Cd,Cu,Hg,Pb,Zn, ≥98%(TLC)
偶氮氯膦Ⅲ
for spectrophotometric det. of alkaline earth metals
N,N-二乙基對(duì)苯二胺硫酸鹽
for spectrophotometric det. of S2-,Cl2, ≥99%
高鐵試劑
for spectrophotometric det. of Fe(III), ≥98.5%
1-氨基-2-萘酚-4-磺酸
for spectrophotometric det. of Si, ≥95%
四苯基卟啉四磺酸水合物
for spectrophotometric det. of transition metals, ≥95%
菲啰嗪
for spectrophotometric det. of Fe, ≥97%
5-Bromo-PAPS
for spectrophotometric det. of Zn(II), Cu(II), Fe(II), Co(II), H2O2, ≥95%
1,3-萘二酚
for spectrophotometric det. of glucuronic acid according to Tollens, ≥97%
雙環(huán)己酮草酰二腙
for spectrophotometric det. of Cu, ≥99.0%
4-氨基安替吡啉
for spectrophotometric det. of H2O2 and phenols, ≥98.0%
2,4,6-三吡啶基三嗪
for spectrophotometric det. of Fe, ≥99.0% (HPLC)
二乙酰一肟
for spectrophotometric det. of urea, ≥99.0%
對(duì)苯醌
for spectrophotometric det. of amines, ≥99.5%(HPLC)
3-(2-吡啶基)-5,6-二(2-呋喃基)-1,2,4-三嗪-5',5''-二磺酸 二鈉鹽
for spectrophotometric det. of Fe, ≥99.0%
參考文獻(xiàn):
[1] 葉錫模等編.分析化學(xué) 第2版[M], 1993;
[2] 林國(guó)輝.重鉻酸鉀光度法快速測(cè)定水中化學(xué)需氧量[J].化學(xué)分析計(jì)量,2021,30(10):37-41;
[3] 迪麗努爾·烏拉木.分光光度法檢測(cè)重金屬離子的試驗(yàn)設(shè)計(jì)及應(yīng)用分析[J].地下水,2019,41(03):56-58;
[4] 魏合芹.滴定法與分光光度法測(cè)定COD比較研究[J].資源節(jié)約與環(huán)保,2018,(07):83-85;
[5] 徐大年,孫志林,薛淼.分光光度法測(cè)定醫(yī)用高分子材料溶血性能的實(shí)驗(yàn)探討[J].上海生物醫(yī)學(xué)工程通訊,1986,(01):13-17;
[6] 吳興華.納米材料La-Ag-TiO_2自由基檢測(cè)和抗菌性能的研究[D].佳木斯大學(xué),2014;
[7] 汪菲菲,李娟,陳克金,等.紫外-可見分光光度法檢測(cè)高純度人C1酯酶抑制劑蛋白質(zhì)含量的經(jīng)驗(yàn)公式[J].微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展,2023,51(03):28-35;
[8] 董娜,李文莉,張愛菊,等.基于芬頓試劑-亞甲基藍(lán)體系的褪色分光光度法測(cè)定人血清中過氧化氫酶活性[J].理化檢驗(yàn)-化學(xué)分冊(cè),2023,59(01):56-60;
[9] 夏珍珍,汪淑華,倪永年.化學(xué)計(jì)量學(xué)-動(dòng)力學(xué)分光光度法同時(shí)測(cè)定兩種糖皮質(zhì)類激素[J].分析科學(xué)學(xué)報(bào),2011,27(02):147-152。