DTT應(yīng)用領(lǐng)域
體外診斷試劑輔料
對(duì)蛋白質(zhì)的研究是理解生命現(xiàn)象的關(guān)鍵。
DTT二硫蘇糖醇作為一種強(qiáng)還原劑，可以還原蛋白質(zhì)中的二硫鍵，防止半胱氨酸殘基形成分子內(nèi)和分子間的二硫鍵，幫助我們保護(hù)蛋白質(zhì)中的巰基。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
DTT全名是1,4-二硫代蘇糖醇，分子式是C4H10O2S2，分子量是154.25。
它看起來是一種白色粉末，有點(diǎn)像糖粉，但其實(shí)味道不太好聞。DTT兩個(gè)巰基基團(tuán)賦予DTT強(qiáng)還原性，能夠與其他分子發(fā)生氧化還原反應(yīng)，將其還原為較低價(jià)態(tài)。DTT可溶于水與乙醇，在工作溶液里，DTT的兩個(gè)巰基能將蛋白質(zhì)中的二硫鍵（S-S）有效還原，使其轉(zhuǎn)變?yōu)閮蓚€(gè)單獨(dú)的硫氫鍵（-SH）。
DTT的還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)（含二硫鍵）的構(gòu)象穩(wěn)定性。在pH值為7-9時(shí)最有效而在pH低于3時(shí)失效。因此在使用時(shí)通常置于弱堿性溶液中以保持其穩(wěn)定性。
蛋白質(zhì)研究中的應(yīng)用
DTT在蛋白質(zhì)研究中的應(yīng)用主要集中在以下幾個(gè)方面：
·蛋白質(zhì)還原
DTT能夠還原蛋白質(zhì)中的二硫鍵，這對(duì)于研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能至關(guān)重要。通過破壞蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵，DTT有助于蛋白質(zhì)的解折疊或去聚合，從而暴露蛋白質(zhì)的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，便于進(jìn)一步的研究。
·防止蛋白質(zhì)聚合
在某些條件下，蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生聚合，影響純化效果。DTT可以通過還原二硫鍵，降低蛋白質(zhì)的聚合傾向，提高純化效率和效果。
·蛋白質(zhì)巰基保護(hù)
DTT常用作蛋白質(zhì)巰基的保護(hù)劑，防止蛋白半胱氨酸殘基形成分子內(nèi)和分子間的二硫鍵，這對(duì)于維持蛋白質(zhì)的活性和穩(wěn)定性非常重要。
·核酸研究
DTT可破壞RNase蛋白質(zhì)中的二硫鍵，使RNA酶變性，有助于如RNA建庫(kù)、RNA擴(kuò)增等實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。
使用條件和注意事項(xiàng)
DTT在蛋白純化中的使用條件和注意事項(xiàng)：
·濃度控制
DTT的濃度需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需求和蛋白質(zhì)的特性來確定。過高的DTT濃度可能會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)過度破壞，影響其生物活性；而過低的濃度則可能無法有效地還原二硫鍵，導(dǎo)致蛋白質(zhì)無法充分釋放和純化。
·溫度和時(shí)間控制
DTT的加入時(shí)間和溫度等因素也需要嚴(yán)格控制，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。