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學有機的,怎樣做才能把柱子過好?

提問時間:2021/2/25 15:43:31
學有機的,怎樣做才能把柱子過好?

2條回復:

匿名
2021/2/25 15:43:55
?一般來說,爬板是走柱子的基礎(chǔ)。但是,由于板上的硅膠和柱子里的硅膠有些差別,而且板的分離效率與遠遠高于柱子的分離效率,因此分不開時正常的。 盡量將柱子裝運均,裝結(jié)實,用洗脫液實現(xiàn)平衡柱子,效果會好一些。 裝柱子時,下邊用真空泵抽氣,多次少量加入硅膠,不斷用膠皮抽打。 進樣時,盡量將樣品平鋪。 加入洗脫液時,動作要緩。 最后,可長時減下洗脫梯度。
匿名
2021/2/25 15:45:57

濕法裝柱, 第一要選溶劑,通常是洗脫劑或者洗脫劑中的小極性單一溶劑。

第二要攪拌均勻,就是將柱層析硅膠用上述溶劑浸泡后攪拌至流動性很好且沒有氣泡為止。

第三是倒至柱子中,最好一次倒入,不要分批;可以在柱子上端接一段溶劑球,把所有浸泡好的硅膠(要攪拌起來)一次倒入。

第四是敲柱子,我通常都是用一對20號橡膠塞,從下至上緩慢輕敲,敲兩個來回后將柱子轉(zhuǎn)45度后再重復敲,如此敲三圈,觀察硅膠沉降基本完全即可。敲的時候,柱子中的溶劑可以有很多,此時可打開下面的節(jié)門,邊流邊敲;也可以先放溶劑至硅膠表面,再敲使得硅膠沉降、溶劑出來。這步是關(guān)鍵步驟,而且硅膠表面溶劑不能干。 如此,基本裝好啦。



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